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不同厂家COVID-19抗原检测试剂测试情况-技术专题

2020-10-29 17:33:36



COVID-19疫情发生以来,万渤生物密切跟踪相关研究动向。继COVID-19抗体检测后,抗原检测的工作也告一段落,在及时整理后第一时间发布。

      以下为不同产品对重组抗原,培养抗原的对比检测结果:

 1.选取不同来源的covid-19快速检测产品,对比检测不同的重组抗原及培养抗原。

 2.每种产品检测样品设置:配套的裂解液,用裂解液配制的重组抗原及培养抗原。

  具体如下:

 (1)抗原甲:重组N蛋白,含NTD单体,CTD单体

 (2)抗原乙:重组N+S蛋白,含NTD单体,CTD单体,RBD

 (3)抗原丙:重组N蛋白,含NTD单体,CTD二聚体

 (4)裂解液

 (5)培养物甲:灭活covid-19培养物1

 (6)培养物乙:灭活covid-19培养物2

 (7)培养物丙:灭活covid-19培养物3,精纯(已100倍稀释)

   注:雅培试剂检测培养物丙(稀释倍数为1万倍),检测结果为G3。

 3. 检测结果:




以上为此次主要对照厂家产品,因为篇幅原因,测试结果不理想的试剂未发布。

    实验结果可结合高福院士团队在国际权威学术期刊The EMBO Journal上在线发表了题为:“Structuresof the SARS-CoV-2 nucleocapsid and their perspectives for drug design”(新冠病毒N蛋白结构及药物设计展望)的文章进行分析总结。

 

文章链接:https://www.embopress.org/doi/full/10.15252/embj.2020105938

 

  SARS-CoV-2属于冠状病毒科,为不分节段的单股正链RNA病毒。它编码个大的重叠开放阅读框(ORF1a和ORF1b),4种结构蛋白(S、E、M和N白),以及9种辅助蛋白。其中,N蛋白是病毒粒子的核心成分,它与病毒基因组RNA结合,将RNA包装成核糖核蛋白(RNP)复合体。除了组装外,N蛋白还在病毒mRNA转录和复制中发挥重要作用,并参与免疫调节。有研究报道N蛋白可以与双链RNA结合而具有RNAi抑制活性,可以对抗宿主RNAi介导的抗病毒反应,同时,N蛋白还可诱导感染后的体液和细胞免疫应答,使其成为早期快速诊断和疫苗研发的关键靶标。SARS-CoV-2 N蛋白全长419个氨基酸,由N端结构域(NTD)和C端结构域(CTD)以及连接两个结构域及其两侧的三段无规则柔区(IDR)构成。该文章中,研究人员解析了NTD和CTD蛋白分别为1.8 ?和1.5 ?的高分辨率晶体结构。其中NTD为单体,而CTD形成同源二聚体,NTD和CTD都含有较为保守的结合RNA的正电荷分布区域。与其它感染人的冠状病毒N蛋白结构比较,发现尽管整体结构相似性很高,但仍有其特殊性,如有些区域呈现不同的表面电荷分布规律,推测这些差异可能会影响其与RNA的结合效率。抗原性的差异也为开发特异性的靶向N蛋白的免疫快速诊断方法提供了理论依据。

  开发针对冠状病毒N蛋白的小分子抑制剂,目前主要有两个策略,一是靶向NTD的RNA结合位点,通过阻断N蛋白与RNA的结合从而抑制病毒组装;二是阻断N蛋白寡聚进而抑制RNP形成,或诱导N蛋白异常聚集从而干扰其正常组装。基于这两种策略,已有报道开发出有效抑制其它感染人冠状病毒如HCoV OC43及MERS-CoV的抗病毒小分子抑制剂,如PJ34和5苄氧基芦竹碱(5-benzyloxygramine,P3)。本项研究中,通过比较分析,发现小分子与其N蛋白的相互作用位点在SARS-CoV-2 N蛋白的相应位点也相对保守,暗示小分子可能对SARS-CoV-2依旧有效,表明进一步优化开发广谱性抑制剂前景可期,该研究也为抗新冠病毒药物的设计和优化提供了结构基础。
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